การประยุกต์ใช้การวิเคราะห์ HPLC ในเครื่องระเหยแบบหมุน

โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC) เรียกอีกอย่างว่าโครมาโตกราฟีของเหลวแรงดันสูง โครมาโตกราฟีของเหลวความเร็วสูง โครมาโตกราฟีของเหลวความละเอียดสูง และโครมาโตกราฟีแบบคอลัมน์สมัยใหม่ เป็นเทคโนโลยีการแยกสารเชิงวิเคราะห์ที่มีประสิทธิภาพและรวดเร็วซึ่งพัฒนาขึ้นอย่างรวดเร็วในทศวรรษ 1970 และเป็นวิธีสำคัญของการทดสอบการแยกสารสมัยใหม่

โครมาโทกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC) ใช้ของเหลวเป็นเฟสเคลื่อนที่ และใช้ระบบฉีดแรงดันสูงเพื่อปั๊มเฟสเคลื่อนที่ เช่น ตัวทำละลายเดี่ยวที่มีขั้วต่างกัน หรือตัวทำละลายผสมและสารละลายบัฟเฟอร์ที่มีสัดส่วนต่างกันลงในคอลัมน์โครมาโตกราฟีที่มีเฟสคงที่ หลังจากแยกส่วนประกอบในคอลัมน์แล้ว ส่วนประกอบเหล่านี้จะเข้าสู่เครื่องตรวจจับเพื่อตรวจจับ เพื่อให้สามารถวิเคราะห์ตัวอย่างได้

กลไกการแยกของโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงนั้นเหมือนกับของโครมาโตกราฟีแบบคอลัมน์ทั่วไป แต่การบรรจุนั้นละเอียดกว่าและจำเป็นต้องขับเคลื่อนด้วยปั๊มแรงดันสูง ซึ่งมีประสิทธิภาพของคอลัมน์สูงและความเร็วในการวิเคราะห์ที่รวดเร็ว แตกต่างจากแก๊สโครมาโตกราฟี เฟสเคลื่อนที่ในโครมาโตกราฟีของเหลวยังมีส่วนร่วมในกระบวนการแยกส่วนประกอบด้วย และสามารถปรับองค์ประกอบ สัดส่วน และค่า pH ได้อย่างยืดหยุ่น ด้วยโหมดการแยกที่หลากหลาย ในทางปฏิบัติ ค่าการกักเก็บและการเลือกสรรของตัวอย่างในคอลัมน์โครมาโตกราฟีจะถูกปรับโดยการเปลี่ยนองค์ประกอบของเฟสเคลื่อนที่ เพื่อให้สามารถแยกตัวอย่างที่แตกต่างกันได้

 

ส่วนประกอบของการวิเคราะห์ HPLC

 

คอลัมน์: คอลัมน์นี้เป็นองค์ประกอบหลักของระบบ HPLC ซึ่งใช้ในการแยกสารประกอบในตัวอย่าง คอลัมน์การแยกทั่วไป ได้แก่ คอลัมน์แบบรีเวิร์สเฟส คอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออน คอลัมน์การกรองเจล ฯลฯ และการเลือกจะขึ้นอยู่กับคุณสมบัติของสารประกอบที่จะแยกและวัตถุประสงค์ในการวิเคราะห์

เฟสมือถือ: เฟสเคลื่อนที่คือการรวมกันของตัวทำละลายที่ใช้ใน HPLC เพื่อส่งตัวอย่างผ่านคอลัมน์การแยก เฟสเคลื่อนที่มักจะประกอบด้วยส่วนผสมของตัวทำละลาย ซึ่งสามารถเป็นตัวทำละลายเดี่ยวหรือส่วนผสมของตัวทำละลายหลายตัวในสัดส่วนที่แน่นอน การเลือกการไหลที่เหมาะสมมีความสำคัญมากต่อผลการแยก

ปั๊ม: ปั๊มถูกใช้เพื่อจัดเตรียมเฟสเคลื่อนที่และดันผ่านคอลัมน์แยกด้วยแรงดันระดับหนึ่ง ปั๊มทั่วไป ได้แก่ ปั๊มแรงดันคงที่และปั๊มไล่ระดับ ปั๊มไล่ระดับสามารถรับรู้การเปลี่ยนแปลงองค์ประกอบเฟสเคลื่อนที่เชิงเส้นหรือไม่เชิงเส้น เพื่อให้ได้ผลการแยกที่ดีขึ้น

หัวฉีด: หัวฉีดใช้เพื่อแนะนำตัวอย่างที่จะวิเคราะห์เข้าสู่ระบบ HPLC เครื่องเก็บตัวอย่างอาจเป็นกระบอกฉีดที่ทำงานด้วยตนเองหรือเครื่องเก็บตัวอย่างอัตโนมัติ โดยทั่วไปจะมีคุณลักษณะของปริมาตรที่แม่นยำและความสามารถในการทำซ้ำที่ดี เพื่อให้แน่ใจว่าการฉีดตัวอย่างจะแม่นยำ

เตาอบคอลัมน์: เตาอบคอลัมน์ใช้เพื่อควบคุมอุณหภูมิของคอลัมน์แยก ด้วยการควบคุมอุณหภูมิ จึงสามารถเปลี่ยนแปลงค่าสัมประสิทธิ์การกระจายและความเร็วในการแยกตัวอย่างในคอลัมน์ได้ จึงทำให้เอฟเฟกต์การแยกสารเหมาะสมที่สุด

เครื่องตรวจจับ: เครื่องตรวจจับใช้ในการตรวจจับสารประกอบที่แยกออกจากกันและสร้างสัญญาณไฟฟ้าที่เกี่ยวข้องกับความเข้มข้นของมัน เครื่องตรวจจับทั่วไปได้แก่ เครื่องตรวจจับการดูดซึมที่มองเห็นด้วยรังสีอัลตราไวโอเลต เครื่องตรวจจับเรืองแสง และเครื่องตรวจจับไฟฟ้าเคมี การเลือกใช้เครื่องตรวจจับขึ้นอยู่กับคุณลักษณะของสารประกอบที่จะวิเคราะห์และข้อกำหนดด้านความไวในการตรวจจับ

ระบบการได้มาซึ่งข้อมูล: ระบบเก็บข้อมูลใช้เพื่อรับ บันทึก และวิเคราะห์สัญญาณที่ออกมาจากเครื่องตรวจจับ โดยสามารถแปลงสัญญาณที่ตรวจพบให้เป็นพารามิเตอร์ เช่น พื้นที่สูงสุดและเวลาการเก็บรักษา และให้การวิเคราะห์และการตีความผลลัพธ์

 

หลังจากที่ตัวทำละลายถูกกำจัดออกไปแล้วด้วยเครื่องระเหยแบบหมุนตัวอย่างที่ได้รับมักจะเข้มข้นหรือเป็นของแข็ง หากคุณต้องการวิเคราะห์หรือตรวจจับสารประกอบในตัวอย่างเพิ่มเติม คุณสามารถวิเคราะห์โดยใช้โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC)

ขั้นตอนทั่วไปสำหรับการวิเคราะห์ตัวอย่างหลังจากการระเหยแบบหมุนด้วย HPLC

 

1. การละลายตัวอย่าง: ละลายตัวอย่างหลังจากการระเหยแบบหมุนในตัวทำละลายที่เหมาะสม ควรคำนึงถึงความสามารถในการละลายของสารที่จะวิเคราะห์และข้อกำหนดของเงื่อนไขการวิเคราะห์ HPLC เมื่อเลือกตัวทำละลาย

2. การเตรียมสารละลายมาตรฐาน: หากจำเป็นต้องมีการวิเคราะห์เชิงปริมาณ สามารถเตรียมสารละลายมาตรฐานของสารประกอบที่จะทดสอบเพื่อแก้ไขและคำนวณผลการวิเคราะห์ในภายหลังได้

3. ดำเนินการวิเคราะห์ HPLC: ฉีดตัวอย่างเข้าสู่ระบบ HPLC และตั้งค่าคอลัมน์การแยก เฟสเคลื่อนที่ และเครื่องตรวจจับที่เหมาะสม ตามวัตถุประสงค์ของการวิเคราะห์ ให้เลือกวิธีการและพารามิเตอร์ที่เหมาะสม เช่น อัตราการไหล อุณหภูมิ และโปรแกรมเกรเดียนต์

4. การรวบรวมและการวิเคราะห์ข้อมูล: โครมาโตกราฟีของตัวอย่างจะถูกรวบรวมโดยระบบ HPLC และสารประกอบเป้าหมายจะถูกหาปริมาณหรือระบุตามพื้นที่พีค เวลากักเก็บ หรือพารามิเตอร์อื่นๆ ที่เกี่ยวข้อง สามารถใช้วิธีเส้นโค้งมาตรฐานและวิธีการมาตรฐานภายในสำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณได้

5. การตีความผลลัพธ์: จากผลการวิเคราะห์ สารประกอบในตัวอย่างได้รับการประเมินทั้งในเชิงคุณภาพและเชิงปริมาณ คุณสามารถสร้างรายงานหรือบันทึกผลการวิเคราะห์ได้ตามความต้องการ

 

การใช้ rotovap ในการวิเคราะห์ HPLC มีความหมายเชิงปฏิบัติสองประการ

 

• ความเข้มข้นของตัวอย่าง: ในบางกรณี ความเข้มข้นของตัวอย่างที่จะวิเคราะห์อาจต่ำเกินไป ดังนั้นจึงสามารถใช้เครื่องระเหยแบบหมุนทางเคมีเพื่อทำให้ตัวอย่างเข้มข้นเพื่อเพิ่มความไวในการตรวจจับของสารวิเคราะห์ใน HPLC
• การกำจัดตัวทำละลาย: ในบางตัวอย่าง ตัวทำละลายอาจรบกวนการวิเคราะห์ HPLC ดังนั้นจึงจำเป็นต้องถอดหรือเปลี่ยนตัวทำละลายในตัวอย่างด้วยตัวทำละลายที่เหมาะสมสำหรับ HPLC เครื่องระเหยแบบหมุนในห้องปฏิบัติการสามารถช่วยกำจัดตัวทำละลายและเปลี่ยนตัวอย่างให้อยู่ในรูปแบบที่เหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์ HPLC

 

การวิเคราะห์ HPLC และเครื่องระเหยแบบหมุนเป็นเทคนิคสองเทคนิคที่ใช้กันทั่วไปในการวิเคราะห์ทางเคมี และมีความแตกต่างและมีความเชื่อมโยงบางประการในหลักการและการประยุกต์ใช้

 

ความแตกต่าง

 

หลักการ: HPLC ขึ้นอยู่กับหลักการของโครมาโตกราฟีของเหลว และการวิเคราะห์การแยกและเชิงปริมาณจะเกิดขึ้นได้จากอันตรกิริยาระหว่างเฟสที่อยู่นิ่ง (คอลัมน์) และเฟสเคลื่อนที่ (ตัวทำละลาย) เครื่องระเหยใช้หลักการทำความร้อนและการหมุนเพื่อระเหยตัวอย่างของเหลวอย่างรวดเร็วและกำจัดตัวทำละลายออก เพื่อให้ตัวอย่างเข้มข้นหรือเปลี่ยนสภาพแวดล้อมตัวทำละลายของตัวอย่าง

สาขาการสมัคร: HPLC มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านเคมี เภสัชกรรม สิ่งแวดล้อม และสาขาอื่นๆ และสามารถใช้สำหรับการแยก การระบุ และการวิเคราะห์เชิงปริมาณของสารประกอบในส่วนผสมที่ซับซ้อน การระเหยแบบหมุนส่วนใหญ่จะใช้ในกระบวนการความเข้มข้นของตัวอย่าง การกำจัดตัวทำละลาย และการเตรียมตัวอย่าง และมักใช้ในการสังเคราะห์สารอินทรีย์ การสกัดผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติ การเตรียมตัวอย่าง และสาขาอื่นๆ

ความเร็วในการวิเคราะห์: การวิเคราะห์ HPLC มักจะใช้เวลานานในการแยกและตรวจจับตัวอย่าง ซึ่งอาจใช้เวลาหลายนาทีถึงหลายชั่วโมง เครื่องระเหยแบบหมุนสุญญากาศสามารถระเหยตัวอย่างของเหลวได้อย่างรวดเร็วในระยะเวลาอันสั้น ซึ่งโดยปกติจะใช้เวลาเพียงไม่กี่นาที

 

เชื่อมต่อ

 

ตัวอย่างการรักษา: อุปกรณ์เครื่องระเหยแบบหมุนมักใช้ในการทำให้ตัวอย่างเข้มข้นหรือกำจัดตัวทำละลายออกในระหว่างการเตรียมตัวอย่าง เพื่อสร้างตัวอย่างที่เหมาะสมสำหรับวิธีการวิเคราะห์เพิ่มเติม เช่น HPLC สามารถปรับปรุงผลและความแม่นยำของการวิเคราะห์ HPLC ได้โดยการทำให้ตัวอย่างมีความเข้มข้นและกำจัดตัวทำละลายออกด้วยเครื่องระเหยแบบหมุน

การเลือกตัวทำละลาย: ในการวิเคราะห์ HPLC การเลือกใช้ตัวทำละลายมีความสำคัญมากต่อผลการแยกตัว ที่เครื่องระเหยแบบหมุนสามารถช่วยกำจัดตัวทำละลายออกจากตัวอย่างและเปลี่ยนตัวอย่างให้อยู่ในรูปแบบที่เหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์ HPLC ดังนั้น เครื่องระเหยแบบหมุนสามารถให้สภาวะตัวทำละลายที่น่าพอใจสำหรับการวิเคราะห์ HPLC.

 

เรามีบริการ rotovap การยกแบบแมนนวลและ rotovap การยกแบบไฟฟ้า โปรดติดต่อเราsales@achievechem.comเพื่อปรับแต่งเครื่องระเหยแบบหมุนของคุณเอง